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                氟喹诺酮类〓药物体外抗ASFV活性研究

                / UU快三网 2019-03-09 13:50 右右 网友评论 |

                  摘要:

                  非洲是重要的猪传染性疾病,目前尚无针对非洲猪瘟的有效邀请码疫苗,也没有合适的手机端处置措施。本研究发现氟喹诺酮类药物具有抗非洲猪瘟的▼活性。当将非洲计划猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)早期感染的vero细胞暴露于6种不同的氟喹诺酮类药物或他们的组合时,可以发现ASFV所导致的vero细胞的病变效应大幅的下降。此外,经过7天的药客户端物处理,甚至无法通过PCR手段检出ASFV的核酸,而且◣培养液的上清不能感染新的细胞培养物。脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析登录发现经氟喹诺酮类药物处理后,细胞中病毒DNA的量有所下降↓ぷ,但是并未检测到病毒基因组碎片。在平行组中还发现病毒早期蛋白合成模式有所变化。本研究试验结【果说明,细菌的拓扑异构酶抑制√剂可能通过抑制假定的ASFV的2型拓◣扑异构酶来抑制ASFV的复制,这一研究结果为非洲猪瘟的治疗开辟了新的⌒ 路径。

                  1. 简介

                  非洲猪瘟是一种严重威胁业的疾病。非洲猪瘟在撒哈拉以南非洲国家是一种地方性流规律行病,该病于2007年又经格■鲁吉亚传入欧洲大陆。从那时起,非洲猪瘟就▽不断的传播至邻近的国家或地区,从而彻底的改官网变了欧洲的非洲猪瘟形势。除了已感染非洲猪瘟的国家和地区以外,其他欧盟国家因与感染非瘟的国家地理位置较近的缘〗故,所以也是非瘟高风险地带。俄罗斯联邦及其周边地区非洲猪瘟由于缺乏技巧统一的控制方案,大量的没有生物安全意识的散养户的存在,以及用泔水喂猪的方△式,导致了对非洲猪瘟的控制困难重登录重。

                  在这种形势下,欧盟的非洲猪瘟也时刻存在着传入东欧的◎风险,尤其是通过一些较难控制的途径,比如的迁移、动物或动物产品的非法调运、受污染的传】播媒介等。尽管已经投入了大量的时间和精力,但目前仍然没有研∩制出一种可以控制非洲猪瘟的注册疫苗产品,而且非洲猪瘟的控制需要做到早期诊断和极为严格的生物安全措施,所以非◥洲猪瘟往往会给感染的国家带来很大app的经济损失和社会危害。

                  非洲猪瘟的病原非洲猪瘟病毒是一种大DNA病毒,是非洲猪瘟病毒科的唯一一█个成员。非洲猪瘟病毒可以编码2型app拓扑异构酶(ASFV-TopoII),这一点官网相比于其他可感染哺乳动物的病毒而言是十分独特的。进〗化树分析表明,ASFV-TopoII与宿主细胞≡的TopoII不在同一进化分ios版支,并且还与细菌DNA回旋酶和4型拓扑异∮构酶有25%区域完全一致,由此人们想到通过细菌的拓〇扑异构酶抑制剂(如氟喹诺走势酮类)来干扰ASFV的复制。

                  氟喹诺酮类药物具有抗菌活性,因为氟喹诺酮■类药物可以与细菌DNA回旋酶和4型拓扑异●构酶形成药-酶-DNA裂解复平台合物,从而干扰DNA的复制和促邀请码发细胞死亡(如╳氧化应激和基因组断裂)。DNA回旋酶在DNA解链中发挥开奖很大的作用,而4型拓ξ扑异构酶在基因组分解过程中发挥很大的作用。

                  近期的研究发现氟喹诺酮类药物分子□ 结构所起的化学修饰作用是其“非典型”的抗病毒(RNA病毒或者DNA病毒)作♀用的物质基础。考虑到ASFV可以编码2型app拓扑异构酶,我们要玩法通过试验来分析这些抗生素是否对ASFV的DNA复制和蛋白质合成有★抑制活性,本试验用到的病毒株为Ba71V毒株,用到的培养细『胞为Vero细胞。由于现在还没有合适的非手机端洲猪瘟疫苗以及有效的防控措施,如果能发现一种有效的】抗病毒药物,再将这种药物用于非洲↘猪瘟的防控,那么对于预防登陆非洲猪瘟的扩散必将发挥很大的作用,也可以为政㊣府机构采取干预措施赢得时间。

                  2. 材料和方法(略)

                  3. 结果

                  3.1 感染了ASFV的Vero细胞培养于含》特定氟喹诺酮类药物培养基中,ASFV的细胞下载病变减轻

                  ASFV在感染进程中会伴随有明显的细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)、细胞凋█亡和细胞死亡←,本研究最开始评估30种手机端氟喹诺酮类药物的抗病毒性质时,就是软件参考的Vero细胞的CPE这一指标。一部分氟喹诺酮类药⊙物(恩诺沙星、格帕沙星、巴洛沙星、托氟沙星、加替沙星和加洛沙星)被证实在100μg/ml浓度时有抗病毒效应。被感染过的培养物在开奖4小时后暴露于这些药物7d时间后,其CPE会变小甚至〒消失,当在感染后72小时与未经处理的ASFV感染的Vero细胞作比较的客户端时候,会发现经药物处理☆组细胞接近于正常未感染的细胞。处理组感染ASFV的细胞会见到核碎裂登录所致细胞起泡,而不是典型的CPE现象。经药物处〓理组大部分的细胞单层保持着典计划型的纤维素样形态,而未经处理的细胞则表现出清晰的CPE现象,其质/核比例ios版因此下降,如图1a和图1b。

                  图1:药物处理组与非药物处理组细↘胞形态对比

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